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(2)细胞不贴壁、生长缓慢、生长不好、甚至死亡的可能原因及解决方法

发布时间:2016-07-01 12:03 |  点击次数:

四、培养细胞生长不好

可能原因:

细胞本身的状态

 

细胞传代次数多,细胞老化;

细胞的接种量:接种量过低,细胞生长缓慢;

细胞传代时间过晚:细胞中毒,影响传代后的细胞生长;

胰酶消化时间过长或过短:时间过长,细胞死亡;时间过短,细胞未完全分离而成团,细胞死亡;

细胞的冻存与复苏:慢冻速融。

 

污染

支原体污染

霉菌污染

培养基或血清

 

更换血清或培养基之前未进行验证

选择的培养基是否合适

培养基配制是否准确无误

培养环境

CO2供应是否正常

培养箱或摇床温度控制是否正确

…………

解决方法:

根据以上四个方面的可能原因,做出针对性的解决方案

注意细胞的本身状态:如传代次数、接种量等;

避免产生污染(用正规、合法、可溯源的血清)

要用合适的血清或培养基,最好经过验证

注意实验室的环境

 

五、培养细胞死亡

可能原因: 

培养箱内无CO2; 

培养箱内温度波动太大; 

细胞冻存或复苏过程中损伤; 

培养液渗透压不正确; 

培养液中有毒代谢产物堆积 

解决方法: 

检测培养箱内CO2; 

检查培养箱内温度; 

取新的保存细胞种; 

检测培养液渗透压; 

换入新鲜培养液